{"id":32286,"date":"2023-06-15T10:33:48","date_gmt":"2023-06-15T13:33:48","guid":{"rendered":"https:\/\/equalisveterinaria-ne.com.br\/?p=32286"},"modified":"2023-06-19T10:35:27","modified_gmt":"2023-06-19T13:35:27","slug":"pcr-rflp-no-diagnostico-de-toxoplasma-gondii","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/equalisveterinaria-ne.com.br\/cursos\/pcr-rflp-no-diagnostico-de-toxoplasma-gondii\/","title":{"rendered":"PCR-RFLP no Diagn\u00f3stico de Toxoplasma gondii"},"content":{"rendered":"<p style=\"text-align: justify;\"><em>Toxoplasma gondii<\/em> \u00e9 um cocc\u00eddeo intracelular obrigat\u00f3rio, formador de cistos teciduais, respons\u00e1vel pela zoonose cosmopolita toxoplasmose e descrito como o parasito mais frequentemente diagnosticado em todo mundo. Humanos e animais homeot\u00e9rmicos, incluindo animais dom\u00e9sticos e silvestres s\u00e3o considerados hospedeiros intermedi\u00e1rios. No entanto, os fel\u00eddeos s\u00e3o os \u00fanicos considerados como hospedeiros definitivos. Com rela\u00e7\u00e3o \u00e0s caracter\u00edsticas moleculares, foi descrito o tamanho do genoma do <em>T. gondii<\/em> com 63,0 Mb, 14 cromossomos, 7286 prote\u00ednas que codificam genes e 28,3% de prote\u00ednas codificadoras de genoma.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">A an\u00e1lise de RFLP vem sendo utilizada para o estudo de diferentes protozo\u00e1rios como Trypanosoma, Plasmodium, Naegleria e Acanthamoeba, e helmintos como Schistosoma, Acantamoeba e Taenia. Essa t\u00e9cnica \u00e9 baseada na capacidade de endonucleases de restri\u00e7\u00e3o em reconhecer polimorfismos de nucleot\u00eddeo \u00fanico (SNPs), digerir produtos de PCR e, posteriormente, exibir padr\u00f5es de bandas distintos na eletroforese. Sinteticamente, cada enzima de restri\u00e7\u00e3o reconhece uma sequ\u00eancia espec\u00edfica de quatro, seis ou oito bases; havendo a mudan\u00e7a de uma \u00fanica base dentro dessa sequ\u00eancia, a enzima n\u00e3o clivar\u00e1 o DNA. Clivando-se duas mol\u00e9culas de DNA relacionadas, contudo diferentes, com a mesma enzima de restri\u00e7\u00e3o, pode obter-se segmentos de comprimentos diferentes, que os separando com gel, originam bandas de diferentes pesos moleculares.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">O desenvolvimento das t\u00e9cnicas de PCR tornou poss\u00edvel amplificar locus gen\u00e9ticos espec\u00edficos para an\u00e1lise de RFLP, atrav\u00e9s de um n\u00famero pequeno de c\u00e9lulas, tornando a t\u00e9cnica mais simples, bem como possibilitou a an\u00e1lise direta de amostras sem a necessidade de cultivos prolongados dos isolados, e uma poss\u00edvel altera\u00e7\u00e3o da amostra fora do seu hospedeiro original. Essa t\u00e9cnica detecta varia\u00e7\u00f5es m\u00ednimas em um \u00fanico gene, sendo amplamente utilizada. Visando demonstrar os benef\u00edcios da PCR-RFLP, compara\u00e7\u00f5es com outras t\u00e9cnicas de genotipagem revelaram que essa necessita de uma baixa quantidade de DNA necess\u00e1ria, \u00f3tima qualidade de DNA, uma boa reprodutibilidade e uma boa informatividade por loco. Al\u00e9m disso, a t\u00e9cnica em RFLP \u00e9 vantajosa por n\u00e3o necessitar de muitos utens\u00edlios avan\u00e7ados, apenas um termociclador e equipamentos de eletroforese.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">O uso de m\u00e9todos de caracteriza\u00e7\u00e3o molecular de <em>T. gondii<\/em> atrav\u00e9s de marcadores com maior grau de polimorfismo vem indicando a exist\u00eancia de linhagens recombinantes. Em prol do grande potencial zoon\u00f3tico da toxoplasmose \u00e9 altamente relevante a investiga\u00e7\u00e3o genot\u00edpica proveniente de infec\u00e7\u00f5es em animais e de gen\u00f3tipos de produtos de origem animal, seja para analisar a rela\u00e7\u00e3o entre o gen\u00f3tipo e as propriedades biol\u00f3gicas ou para o rastreamento epidemiol\u00f3gico do agente para identifica\u00e7\u00e3o de vias de transmiss\u00e3o e fatores de risco.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Toxoplasma gondii \u00e9 um cocc\u00eddeo intracelular obrigat\u00f3rio, formador de cistos teciduais, respons\u00e1vel pela zoonose cosmopolita toxoplasmose e descrito como o parasito mais frequentemente diagnosticado em todo mundo. Humanos e animais homeot\u00e9rmicos, incluindo animais dom\u00e9sticos e silvestres s\u00e3o considerados hospedeiros intermedi\u00e1rios. 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